TECNICAS HEMATOLOGICAS

DERTERMINACION CUANTITATIVO DE COLESTEROL HDL PRINCIPIO DEL METODO Determinación directa del HDLc (colesterol de lipoproteinas de alta densidad) sin necesidad de pre/tratamiento o centrifugado de la muestra. La determinación se realiza en dos pasos; 1. Eliminación de lipoproteinas no/HDL          esteres colesterol        coleasterol  ácidos grasos          colesterol   O2              colestenona   H2O2          2  H2O2                          2H2O   O2 2. Medición de HDLc         esteres colesterol           colesterol    ácidos grasos         colesterol  O2                  colestenona  H2O2     ...

TIEMPO DE SANGRIA SIGNIFICADO CLINICO El tiempo de sangría es un test global que evalúa la formación del tampón plaquetario que se forma como resultado de al adhesión de las plaquetas a la pares de los vasos y la subsiguiente agregación. Mide el tiempo que tarde en detenerse la hemorragia provocada por la injuria de los pequeños vasos. El test depende de la función plaquetaria, del adecuado numero de plaquetas funcionalmente intactas, de la presencia de proteínas plasmáticas adheridas que permiten la adhesión de las plaquetas a la pared vascular injuriada y la agregación plaquetaria, y de la integridad de la matriz de la pared vascular. Un tiempo de sangrado prolongado requiere de futuros análisis y sugiere un desorden de la hemostasia primario que puede ser adquirido, hereditario o inducido por drogas. La propagación del tiempo de sangría con un recuento de plaquetas normal indica la presencia de síndrome de Von Willebrand o una disfunción plaquetaria o una hipo o disfi...

DETERMINACION DE COOMBS INDIRECTO FUNDAMENTO En esta prueba se trata de investigar la presencia ded Ac incompletos libres en el suero del paciente. Los hematíes que han de servir de reactivo para la prueba han de ser de estructura antigénica conocida (grupo O Rh+). La prueba se realiza en dos fases: En la primera fase, se incuba el suero del paciente con unos hematíes conocidos O, Rh+, que no tienen adheridos a su superficie ningún tipo de Ig ni ningún componente del complemento. La finalidad de esta incubación consiste en sensibilizar n vitro los hematíes tipo, por parte de los Ac incompletos que puedan estar contenidos en el suero problema. En una segunda fase, se añade un suero antiglobulina humana, que producirá una aglutinación de los eritrocitos, en el caso de que éstos se hayan sensibilizado en la fase anterior.  Se realiza en tubo y se utiliza para: En pruebas cruzadas, para detectar incompartibilidades Para la detección e identificación de anticuerpos irregul...

DETERMINACIÓN DE COOMBS DIRECTO EN TUBO OBJETIVO Determinar si existen o no anticuerpos irregulares fijados en la membrana de los hematíes del paciente enfrentando estos al reactivo de Coombs específico para ello. MATERIAL Material para lavado y dilución de los hematíes Portaobjetos, cubreobjetos y tubo de hemolisis Pipetas de Pasteur, visualización y microscopio REACTIVO AGH Y SF Hematíes control sensibilizados con IgG MUESTRA Sangre anticoagulada PRECAUCIONES Es preferible que la muestra esté anticoagulada con EDTA, porque así se evita la sensibilización de los hematíes in vitro por la activación del complemento PROCEDIMIENTO Realizamos el lavado de hematíes utilizando 0,5 ml se sangre total y incorporando solución salina fisiológica.  Centrifugamos a 2500rpm durante 1 minuto Repetimos este proceso 3 veces, hasta obtener un sobrenadante transparente Resuspendemos el sedimento de hematíes dando pequeños golpecitos en el fondo del tubo....

HEMATOCRITO FUNDAMENTO Se llama hematocrito al volumen que ocupan los hematíes con respecto al volumen total de sangre. Se expresa en %, es decir cm3 o ml de hematíes que hay en 100 cm3 de sangre.  Al centrifugar sangre total las partículas pesadas que se depositan en el fondo son los hematíes, sobre estos se depositan partículas mas ligeras como los leucocitos y las plaquetas y por último en la parte superior del tubo se encuentra el plasma. De esta manera, se originan unas bandas de sedimentación observables a simple vista. La lectura debe hacerse sobre la parte superior de los hematíes y evitar el resto de células, sobre todo en caso de aumento de leucocitos y plaquetas.    MATERIAL   Capilares heparinizados desechables Centrífuga de microhematocrito (24 muestras máximo) Plantilla de lectura MUESTRAS  Sangre capilar PROCEDIMIENTO Llenar los tubos capilares con la sangre problema hasta las tres cuartas partes de su longitud. El llenado se...

DETERMINACIÑON CUANTITATIVA DE  HEMOGLOBINA  PRINCIPIO DEL METODO Con esta práctica queremos conocer el valor de hemoglobina en unas determinada parte de la población. Cuando la hemoglobina es oxidada por acción del ferricianuro, se convierte en metahemoglobina y mediante el cianuro se convierte en cianmetahemoglobina. Debemos conocer un valor de referencia, para con la intensidad de color poder saber la concentración de hemoglobina presente en la muestra. SIGNIFICADO CLINICO La hemoglobina es una proteína que contiene hierro, y otorga en color rojo a la sangre. Se encuentra en los glóbulos rojos y es la encargada del transporte de oxigeno por la sangre desde los pulmones a los tejidos. Cuando el nivel de hemoglobina aparece por debajo de los niveles normales, indica anemia y si esta por encima indica poliglobúlia. REACTIVOS HEMOGLOBIN 50x formado por: Ferricianuro de potasio (0.60 mmol/L) Cianuro de potasio (77 mmol/L) Dihidrógeno fosfato de potasio (2mmol/L...

FROTIS SANGUINEO FUNDAMENTO  Para realizar las extensiones en el laboratorio se suelen utilizar muestras de sangre, obtenida por venopunción, recogida en tubos con anticoagulante EDTA. No obstante, existen otros métodos para obtener sangre para los extendidos, como las punciones digitales y del talón. Tras la punción se pueden hacer directamente extensiones a partir de una o varias gotas de sangre del dedo o del talón, o recogerlas en tubos de microhematocrito heparinizado. Para hacer las extensiones de esta forma hay que hacerlas en la cabecera del paciente.  Estos métodos tiene una seria de inconvenientes: Puede darse cierta aglutinación plaquetar Solo puede hacerse  un número determinado de extensiones También existen en el mercado tubos para recolección de sangre capilar diseñados para la recogida de pequeños volúmenes de sangre. Son utilizados para la extensión, el transporte  y el procesamiento de muestras de sangre capilar en neonatos , niños y, en ...