PRÁCTICA 11 DETERMINACIÓN DE COOMBS DIRECTO EN TUBO

DETERMINACIÓN DE COOMBS DIRECTO EN TUBO

OBJETIVO
Determinar si existen o no anticuerpos irregulares fijados en la membrana de los hematíes del paciente enfrentando estos al reactivo de Coombs específico para ello.

MATERIAL
  • Material para lavado y dilución de los hematíes
  • Portaobjetos, cubreobjetos y tubo de hemolisis
  • Pipetas de Pasteur, visualización y microscopio
REACTIVO
  • AGH Y SF
  • Hematíes control sensibilizados con IgG


MUESTRA
  • Sangre anticoagulada
PRECAUCIONES
Es preferible que la muestra esté anticoagulada con EDTA, porque así se evita la sensibilización de los hematíes in vitro por la activación del complemento

PROCEDIMIENTO
  • Realizamos el lavado de hematíes utilizando 0,5 ml se sangre total y incorporando solución salina fisiológica. 
  • Centrifugamos a 2500rpm durante 1 minuto
  • Repetimos este proceso 3 veces, hasta obtener un sobrenadante transparente
  • Resuspendemos el sedimento de hematíes dando pequeños golpecitos en el fondo del tubo.



  • OBSERVACION 
Debemos observar si vemos aglutinación o no, con ayuda de un visualizador
En nuestro ensayo no observamos aglutinación, lo que quiere decir que los hematíes permanecen en forma de suspensión homogénea de color rojizo.

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