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PRACTICA 17: TIEMPO DE TROMBOPLASTINA

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DETERMINACIÓN DEL TIEMPO DE TROMBOLASTINA PARCIAL ACTIVADA PRINCIPIO DEL MÉTODO Los factores intrínse cos de la coagulación se activan en presencia de  un complejo fosfolipídico y un activador soluble en plasma citratado; se mide el tiempo transcurrido después de la adición del cloruro cálcico  (CaCl2) hasta la formación del coágulo de fibrina. SIGNIFICADO CLÍNICO La medida del tiempo de APTT, es la determinación más común junto con la PT, sirve para determinar trastornos de la coagulación y es particularmente sensible a los defectos de la coagulación intrínseca. Se usa normalmente para la monitorización de las terapias anticoagulantes con heparina.  REACTIVOS R1 ACTIVADOR: Formado por ácido elágico, tampón y conservantes R2 INICIADOR: Cloruro cálcico (0,02M) CONTROL MUESTRA Plasma citratado refrigerado  PROCEDIMIENTO  Encendemos el coagulómetro y ponemos los reactivos y la muestra en la placa calefectora para calentarlos. Pr...

PRACTICA 16: TIEMPO DE PROTOMBINA (PT)

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DETERMINACIÓN DEL TIEMPO DE PROTOMBINA USO PREVISTO Pa ra la evaluación de la vía extrínseca de la coagulación y para el control de la Terapia Anticoagulante Oral en plasma humano citratado .  PRINCIPIO DEL MÉTODO El ensayo mide el tiempo transcurrido hasta la formación del coágulo después de la mezcla del plasma con Tromboplastina.  La coagulación se inicia por activación del FVII con el Factor Tisular. REACTIVOS PT -> Tromboplastina de cerebro de conejo, cloruro cálcico, inhibidor de heparina, tampón y       conservantes. Liofilizado PREPARACIÓN   Reconstituir el contenido de un vial con2 mL de agua destilada. Lo tapamos y mezclamos suavemente hasta disolver su contenido completamente.  Debemos intentar evitar la formación de espuma. Agitar antes de cada uso . MUESTRA Utilizamos plasma congelado. Antes de su uso, lo ponemos en el baño para atemperarlo. PROCEDIMIENTO DEL TEST PT Encendemos el coagulómetro, y c...

PRACTICA 15: FIBRINOGENO METODO DE CLAUSS

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FIBRINOGENO METODO DE CLAUSS DETERMINACION CUANTITATIVA DE FIBRINOGENO PRINCIPIO DEL MÉTODO El Fibrinógeno, en presencia de un exceso de trombina, se transforma en Fibrina.  El tiempo de formación del coágulo es inversamente  proporcional a la concentración de Fibrinógeno presente en la muestra de plasma. La determinación de fibrinógeno por el tiempo de coagulación de trombina, está basada en el método descrito por Clauss1. En presencia de altas concentraciones de trombina, el tiempo necesario para la formación del coágulo en el plasma diluido es inversamente proporcional a la concentración de fibrinógeno . SIGNIFICADO CLÍNICO  El Fibrinógeno (Factor I), proteína sintetizada en el hígado, es un componente de la sangre utilizado para formar el coágulo. Su determinación nos ayuda a evaluar las alteraciones en los mecanismos de coagulación.  La concentración de fibrinógeno se incrementa en inflamaciones agudas y embarazo; por el contrario se observan valores ...

PRACTICA 14: DETERMINACION HDL COLESTEROL D

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DERTERMINACION CUANTITATIVO DE COLESTEROL HDL PRINCIPIO DEL METODO Determinación directa del HDLc (colesterol de lipoproteinas de alta densidad) sin necesidad de pre/tratamiento o centrifugado de la muestra. La determinación se realiza en dos pasos; 1. Eliminación de lipoproteinas no/HDL          esteres colesterol        coleasterol  ácidos grasos          colesterol   O2              colestenona   H2O2          2  H2O2                          2H2O   O2 2. Medición de HDLc         esteres colesterol           colesterol    ácidos grasos         colesterol  O2                  colestenona  H2O2     ...

PRACTICA 13: TIEMPO DE SANGRIA

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TIEMPO DE SANGRIA SIGNIFICADO CLINICO El tiempo de sangría es un test global que evalúa la formación del tampón plaquetario que se forma como resultado de al adhesión de las plaquetas a la pares de los vasos y la subsiguiente agregación. Mide el tiempo que tarde en detenerse la hemorragia provocada por la injuria de los pequeños vasos. El test depende de la función plaquetaria, del adecuado numero de plaquetas funcionalmente intactas, de la presencia de proteínas plasmáticas adheridas que permiten la adhesión de las plaquetas a la pared vascular injuriada y la agregación plaquetaria, y de la integridad de la matriz de la pared vascular. Un tiempo de sangrado prolongado requiere de futuros análisis y sugiere un desorden de la hemostasia primario que puede ser adquirido, hereditario o inducido por drogas. La propagación del tiempo de sangría con un recuento de plaquetas normal indica la presencia de síndrome de Von Willebrand o una disfunción plaquetaria o una hipo o disfi...

PRACTICA 12: DETERMINACION DE COMMBS INDIRECTO

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DETERMINACION DE COOMBS INDIRECTO FUNDAMENTO En esta prueba se trata de investigar la presencia ded Ac incompletos libres en el suero del paciente. Los hematíes que han de servir de reactivo para la prueba han de ser de estructura antigénica conocida (grupo O Rh+). La prueba se realiza en dos fases: En la primera fase, se incuba el suero del paciente con unos hematíes conocidos O, Rh+, que no tienen adheridos a su superficie ningún tipo de Ig ni ningún componente del complemento. La finalidad de esta incubación consiste en sensibilizar n vitro los hematíes tipo, por parte de los Ac incompletos que puedan estar contenidos en el suero problema. En una segunda fase, se añade un suero antiglobulina humana, que producirá una aglutinación de los eritrocitos, en el caso de que éstos se hayan sensibilizado en la fase anterior.  Se realiza en tubo y se utiliza para: En pruebas cruzadas, para detectar incompartibilidades Para la detección e identificación de anticuerpos irregul...